抗體如何保存

保存溫度和條件

對于我們的很多抗體而言，分裝成小等份并凍存于 -20℃  或 -80℃ 是zui保存條件。分裝成小等份可zui大程度減少由凍融造成的損傷，以及從單個試劑瓶中多次吸取而引入的污染。小等份只需凍融一次，如有剩余，可將剩余物保存于 4℃ 。 在收到抗體時，在 10,000 × g 下離心 20 秒以沉積截留于試劑瓶螺紋的溶液，并以小等份轉移至低蛋白結合微量離心管中。小等份的量取決于實驗人員在實驗中通常采用的量。小等份應不小于10 μl；等份越小，儲液濃度因抗體蒸發及吸附于保存瓶表面而受到的影響越大。

在大多數情況下，收到抗體時在 4℃下保存一至兩周，然后再冷凍進行*保存是可接受的，但也許腹水液是例外，它可能包含蛋白酶，因而應該盡快凍存。同樣，遵照數據表上的建議是重要的。

免責條款和其它特別條件：

酶偶聯抗體不應凍存，而應保存于 4℃. 凍融不僅影響抗體結合能力，還會降低酶活性。

無論偶聯至熒光染料、酶還是*，偶聯抗體都應保存于深色試劑瓶中或用金屬箔包裹。暴露于光線中將損害偶聯物的活性。特別是熒光偶聯物易受到光漂白影響，在實驗的所有階段都應避光。

IgG3 同型抗體具有解凍時形成聚集物的*趨勢，應始終保存于 4℃。

用*防止污染

為了防止微生物污染，可將*加入抗體制備品中達到0.02% (w/v). 的終濃度。很多 Abcam 抗體已經包含這種防腐劑抗體已經包含這種防腐劑，所用濃度范圍為 0.02 至 0.05%。這會標示在數據表上標題為“保存緩沖液”的欄目。

不使用*的情形：

如果用抗體染色或處理活細胞，或如果用抗體進行體內研究，一定要使用不包含*的制備品。該抗菌劑也對大多數其它生物具有毒性：它阻斷細胞色素電子傳遞系統。

*會干擾氨基參與的任何偶聯，應在偶聯進行前除去。偶聯后，抗體可保存于*中，除此以外，0.01% 硫汞撒（硫柳汞）不含伯胺，也是可接受的替代物。

*可通過透析或凝膠過濾從抗體溶液中除去。IgG 的分子量為 150,000 道爾頓（IgM 為約 600,000）；*的分子量為 65 道爾頓。截留分子量為 14,000 道爾頓的微透析裝置可保留抗體同時使疊氮化物向外擴散。在保持于 4℃ 的磁性攪拌器上的燒杯中，每毫升抗體使用至少一升冷 PBS 并攪拌透析裝置 6 小時。更換 PBS 兩次，每次更換攪拌至少 6 小時。如有可能，所有材料都應滅菌并且所得的制備物應無菌操作。

冷凍/融化損傷

重復冷凍/融化循環可使抗體變性，導致其形成使抗體結合能力降低的聚集物。

保存于 -20℃ 對于大多數抗體是適當的；保存于 -80℃無明顯優勢。冰箱不能為無霜型。 這些冷凍和融化之間的循環（以減少結霜）恰恰是應該避免的。出于相同原因，抗體試劑瓶應置于具有zui小溫度波動的冰箱區域，例如朝冰箱后部放置而不是置于門架上。

有些研究人員加入冷凍保護劑甘油達到 50% 的終濃度以防止冷凍/融化損傷；甘油可將凝固點降低至低于 -20℃。雖然這對于很多抗體是可接受的，但是只有一小部分我們提供的抗體測試了在該保存條件下的穩定性，并且我們的保證僅適用于按數據表上*的方式保存的抗體。不建議將包含甘油的溶液保存于 -80℃，因為該溫度低于甘油的凝固點。請注意甘油可被細菌污染。如果加入甘油或任何冷凍保護劑，則應當小心操作，以得到無菌制備物。

應避免抗體在稀釋至工作濃度后在 4℃ 下保存超過一天。蛋白質在高濃度下保存時一般不易降解，理想的濃度為1mg/ml 或更高。這是在抗體溶液中加入蛋白質例如 BSA 作為穩定劑的理論基礎。加入的蛋白質也有助于減少抗體因結合于容器壁上而造成的損失。對于打算進行偶聯的抗體而言，由于穩定蛋白質會與抗體競爭，降低了偶聯的效率，所以不應加入穩定蛋白質。